果树栽培技术网(www.5stat.com)已开通!

染色体畸变的诱导

2019-06-29 16:04:02 养殖种植技术书籍

染色体畸变的诱导

目的 初步了解染色体数的变异情况,学会诱导植物细胞染色体多倍体化的基本方法。

实验前的思考 生物性状的稳定性,是基于生物物种的染色体形态、数目的恒定,如果染色体数发生变化,性状就会产生能遗传的变异。人工诱导多倍体植物的培育,是运用物理、化学的方法干扰影响细胞正常分裂,而使细胞染色体多倍体化的结果。蚕豆体细胞染色体数为2n=12,如果诱导多倍体成功,染色体数就超过这个数。

材料器具 干燥的蚕豆种子;显微镜,载玻片,盖玻片,解剖剪,解剖针,刀片,镊子,酒精灯,吸水纸,小玻管,烧杯,砂盘;乙酸乙醇固定液,浓盐酸,75%乙醇,龙胆紫染液。

步骤

1.诱发蚕豆根尖细胞多倍体的形成 把50颗干燥的蚕豆种子浸在清水中一昼夜,使它们吸胀萌动,用清水轻轻淋洗后,放在湿砂中培养,待根部长达1.5厘米时,取出1/2种子移至干燥砂盘中作诱导处理,其余的1/2种子仍留在湿砂中培育,作为对照组。

2.干燥处理一昼夜后,可以看到幼根生长停滞,出现萎蔫干缩状态。在干砂中浇水使蚕豆湿润,继续培育处理组,24小时后,可以看到部分种子的幼根恢复生长能力,并在根尖处形成膨大的结节。

3.在上午10∶00~11∶30,下午15∶30~17∶00或夜间0∶30~1∶30细胞分裂高峰期,以刀片切下长度为1厘米的根尖部分,放在前后相通的小玻管中,两端蒙以扎紧的纱布,放入乙酸乙醇液中固定,4小时后,把装有材料的玻管取出,用95%乙醇浸洗,以除去乙酸,然后移入75%乙醇中保存。

4.解离、染色和制片 实验前,把所保存的装有根尖的玻管放入装有盐酸乙醇解离液(参见本书第835页的配制方法)的烧杯中,对根尖进行解离处理。5分钟后,倾去解离液,以流水冲洗仍放在小玻管中的根尖5~10分钟。

从小玻管中取出水洗后的根尖,放在洁净载玻片上,用刀片切下根尖前端长约0.5厘米的一段,除去其余部分,然后滴上2滴龙胆紫染液,以淹没材料为度。10分钟后,盖上盖玻片,并在盖玻片上覆以小块吸水纸,进行压片,使根尖铺展成一薄层,并使细胞内染色体充分展开,以便观察。

5.吸水引流法 用清水替换盖玻片下的染液,然后放在显微镜下以低倍镜镜检,找到分裂相较多的部分后,换高倍镜仔细观察处于分裂期中期的细胞,可以看到部分细胞中染色体分裂异常情况或染色体数已整倍增加。

版权保护: 本文由 果树栽培技术网 原创,转载请保留链接: http://www.5stat.com/yangzhizhongzhijishushuji/2019/0629/103989.html