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蚜虫胚胎组织染色体的制备

2019-06-29 16:03:45 养殖种植技术书籍

蚜虫胚胎组织染色体的制备

目的 学习用昆虫胚胎组织为材料制备染色体,观察昆虫染色体的形态特征。

实验前的思考 蚜虫的若虫胚胎细胞分裂旺盛,经简单处理后即能制得染色体标本。

材料器具 适龄蚜虫;解剖镜或放大镜,显微镜,解剖针,培养皿,载玻片,盖玻片,吸水纸;生理盐水(0.85%氯化钠溶液),0.05%秋水仙素,45%丙酸(或乙酸),甲醇,乙酸,5%吉姆萨(Giemsa)染液。

步骤

1.把3、4龄的无翅或有翅雌蚜放在生理盐水中,沿腹部末端剖开,挤出胚胎。

2.把挤出的胚胎放入0.05%秋水仙素溶液中处理20分钟。

3.经秋水仙素处理的胚胎经水洗并吸干后移入新鲜配制的甲醇乙酸(3∶1)固定液内,固定20分钟。

4.从固定液中取出胚胎,放在一块干净的载玻片上,在解剖镜下剔除已出现眼点的胚胎,滴上一滴45%的丙酸或乙酸软化材料,加盖玻片,用铅笔头轻敲压片。

5.从盖玻片边缘滴入5%吉姆萨染液,染色15分钟,显微镜观察。

分析和讨论

1.发育早期的蚜虫胚胎是良好的细胞有丝分裂的材料。

2.如果丙酸或乙酸软化水解程度不足,压片不易分散。可以改用1N氯化氢代替,但这时须掌握时间,不能太长,水解后一定要水洗干净,以免影响染色效果

(陆建身)

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