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线粒体的观察

2019-06-29 15:59:01 养殖种植技术书籍

线粒体的观察

目的 认识最重要的细胞器之一线粒体的基本形态和分布,学会在光学显微镜下观察线粒体的技能。

实验前的思考 线粒体是广泛存在于动、植物细胞中的重要细胞器。它呈短棒形,长0.4~3微米,宽0.3~0.8微米,光学显微镜刚好能看清它的轮廓(光学显微镜分辨率在0.2微米)。线粒体是细胞内糖、氨基酸、脂肪酸最终氧化的场所,所以有“动力工厂”之称。利用这个性质,线粒体可使特异性染料詹姆斯绿(Janus green)保持氧化状态,呈蓝绿色,线粒体周围的细胞质中的詹姆斯绿被还原成无色状态,从而显示线粒体。

材料器具 洋葱;显微镜,载玻片,盖玻片,消毒牙签,吸水纸,镊子;0.02%詹姆斯绿染液。

步骤

1.詹姆斯绿染液的配制配制0.9%的生理盐水200毫升。称取1克詹姆斯绿,溶于50毫升生理盐水中,再用生理盐水稀释100倍,装入棕色瓶备用。

2.观察人口腔上皮细胞线粒体

(1)把清洁的载玻片平放在桌上,滴上数滴詹姆斯绿染液于载玻片中央。

(2)用消毒牙签的钝端在自己口腔颊粘膜处稍用力刮取口腔上皮细胞,均匀地涂到载玻片的染液中。盖上盖玻片,四周溢出的染液用吸水纸吸干。

(3)5分钟后用高倍镜或油镜观察,可以看到在接近无色的口腔上皮细胞的细胞质中,特别是在细胞核周围,散布着许多被染成蓝绿色的短棒状或颗粒状结构,即为线粒体。

3.观察洋葱鳞茎表皮细胞线粒体

(1)撕取5×5毫米一块新鲜洋葱鳞茎内表皮,展平在洁净载玻片中央。

(2)滴上数滴詹姆斯绿染液染色10分钟,盖上盖玻片,用吸水纸吸去周围溢出的染液。

(3)在高倍镜或油镜下可以观察到细胞质中的线粒体被染成蓝绿色,呈条状或颗粒状(图示)。

注意事项 詹姆斯绿染液浓度不宜过高,染色时间不宜太长,否则细胞质会重新氧化成有色状态而不能充分还原染料成无色状态。

分析和讨论 真核细胞内一般都存在线粒体,但存在的数量相差较大。动物细胞中的心肌细胞和肝脏细胞中线粒体数量最多;植物细胞中幼苗和贮藏组织的细胞中线粒体较多。选取植物细胞的材料应该避免组织坚硬、细胞壁厚老及富含叶绿体的材料,宜选黄化幼苗或新鲜、生长势旺的组织。

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