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磷脂单分子膜模型的制作

2019-06-29 15:58:53 养殖种植技术书籍

磷脂单分子膜模型的制作

目的 通过制作磷脂单分子膜模型,领会双层磷脂分子所构成的细胞膜的状态。

实验前的思考 每个细胞都被一层细胞膜覆盖,但是用光学显微镜看不到。近年来应用电子显微镜等新技术、新方法了解到细胞膜以双层磷脂分子为骨架,不同程度地镶嵌着蛋白质分子。本实验用卵磷脂为材料,作一个单层磷脂分子的模拟膜,来领会双层磷脂分子所构成膜的状态。

材料器具 试管架,试管,滴管;亚甲基蓝,正丁醇溶液,卵磷脂,95%乙醇。

步骤

1.配制亚甲基蓝正丁醇溶液 称取0.025克亚甲基蓝,溶于100毫升正丁醇中。

2.配制4%卵磷脂溶液 称取4克卵磷脂,溶于100毫升正丁醇中,再加入0.025克亚甲基蓝,混和搅匀即成。卵磷脂除购买以外,也可以自制。制备方法是,取10克卵黄,放入小烧杯内,加入70毫升热的95%乙醇搅拌。冷却后,滤入干燥的烧杯中,滤液如果混浊,可以再滤一次,把滤液在水浴上蒸干即成。

3.取两支试管,编号。在两支试管中各加入3毫升蒸馏水。注意,不能沾湿上部的内管壁,最好用滴管深入试管内滴加。

4.在1号试管内慢慢加入4滴4%卵磷脂溶液。为了避免滴入的溶液直接冲入水下层,影响卵磷脂分子的排列,应该使试管倾斜,用滴管一滴滴地把溶液滴在试管壁上,让它缓缓下流(图示)。待试管里形成清楚的两个相时,再轻轻地竖直试管,平稳地放在试管架上。

5.在2号试管内,用同样方法滴入4滴亚甲基蓝正丁醇溶液,静放在试管架上。

6.20分钟后,观察每支试管中两个相有什么变化。

注意事项

1.本实验适宜在室温30℃以下进行,超过30℃会影响实验效果

2.步骤4必须严格按要求逐滴地、缓慢地把溶液滴在管壁上,有利卵磷脂分子在两相中排列。

分析和讨论

1.实验结果,1号试管内,两种液体之间有明显的界面,上层蓝色,下层为透明的水。2号试管内,上层蓝色亚甲基蓝正丁醇溶液逐渐透过界面,向水层中渗入,形成均匀的蓝色溶液。

2.在1号试管中,溶液里的卵磷脂分子在两相的界面上按亲水基团和疏水基团的作用,排成一层单层卵磷脂分子膜,它能阻挡亚甲基蓝透过。通过实验可以进一步理解,真正的生物膜由双层磷脂分子构成,它们的亲水性头部暴露在两侧的水中,而它们的疏水性的尾部排向磷脂层的中间。

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