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细胞膜主动运输功能的实验

2019-06-29 15:58:50 养殖种植技术书籍

细胞膜主动运输功能的实验

目的 验证和认识细胞主动运输的基本原理,学会研究活细胞生理功能的操作方法。

实验前的思考

细胞主动运输是一种耗能的活性功能。它的运输速度跟环境有关,运用高温、氧化磷酸化解偶联剂,如二硝基苯酚、氰化钾等能明显抑制主动运输的进行。因此,也就能观察到主动运输现象。

材料器具

活蝗虫,蟋蟀,蟑螂(蜚蠊)或其他大型昆虫;培养皿或小烧杯,镊子,解剖针,解剖蜡盘,剪刀,载玻片,酒精灯,显微镜;昆虫任氏液,酚红染液,0.01摩尔/升氰化钾溶液。

步骤

1.在解剖蜡盘内用大头针固定活蝗虫,腹面向上。剪开腹部,暴露血腔,在中后肠交界处可以看到有数十条盲管游离在血腔内,这就是昆虫的排泄器官马氏管(见图)。小心分离马氏管,沿根部剪断,立即投入不含酚红的任氏液中。

2.在干净载玻片上放上几条马氏管,滴上一滴含有酚红染料的任氏液,放在显微镜下观察,可以看到马氏管管腔内的红色染料逐步积累,并逐渐超过管外的浓度。

3.取几根马氏管,放于60℃以上水浴锅中水浴,使马氏管失去活性,再重复步骤2,观察有何不同。

4.在0℃、15℃、30℃等不同温度下水浴数分钟,重复步骤2,观察染料主动吸收的不同速度。

5.在马氏管上先滴加一滴氰化钾溶液,再滴上酚红任氏液,观察染料摄入情况(注意,氰化钾溶液有毒,用后彻底清洗器材)。

注意事项 昆虫马氏管离体一段时间内仍保持活性,这跟环境、温度等条件有关,一般可保持活性一二小时。操作宜快速细心,环境温度以20℃左右为宜。酚红染液宜淡,否则难以显示马氏管内浓度高出管外浓度。

分析和讨论 活性马氏管有主动运输功能,能逆浓度吸收染料。失活马氏管已成为物理性渗透系统,不具主动运输功能。实验表明主动运输的速度跟环境温度有关。当氰化钾存在时,阻断氧化磷酸化过程,抑制主动运输。

(陆建身)

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